“免疫”一词源自拉丁语“immunitas”，最早指免除义务，后引申为对疾病的抵抗力。免疫系统通过防御外来病原和清除受损细胞来保护机体。流式细胞术自1934年首次应用以来，结合单克隆抗体技术，凭借其高通量、快速和多目标分析的优势，成为免疫学研究及精准医学中的重要工具。实验前了解细胞亚群标记物和抗原密度至关重要，但许多初学者面临困难。为此，小编总结了常用免疫细胞标记物，分两章进行分享，帮助大家顺利进行流式实验。

免疫细胞及常用标记物

免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成，其中免疫细胞主要负责执行免疫功能。根据免疫应答类型，免疫细胞分为固有免疫细胞和适应性免疫细胞。

固有免疫细胞包括：巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤（NK）细胞、NKT细胞、固有淋巴样细胞、粒细胞和肥大细胞等。

适应性免疫细胞则包括T细胞和B细胞，它们通过表达特异性抗原识别受体（TCR/BCR）来执行免疫功能。

免疫细胞的标记物广泛应用于流式细胞术，以帮助区分和鉴定不同类型的免疫细胞。

1.CD45（白细胞共同抗原）

CD45（白细胞共同抗原，LCA）是一种1型跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPase），在除成熟红细胞和血小板外的所有造血细胞中都有表达。作为重要的造血细胞标志物，CD45在T和B细胞的抗原受体介导的活化过程中起调节作用。其分子量为180-220 kDa，由胞内磷酸酶结构域、跨膜结构域和胞外结构域组成。CD45的平衡失调可能导致免疫缺陷或自身免疫疾病。人CD45有多个异构体，第4、5、6号外显子选择性剪切而产生，不同异构体的表达依赖于细胞类型及其活化或分化状态，如CD45RA在幼稚T细胞中表达，CD45RO在活化或记忆T细胞中表达。

小鼠CD45有两种等位变异形式，CD45.1和CD45.2，分别在不同的小鼠谱系中表达。大多数小鼠谱系（如BALB/c、C57BL）表达CD45.2，而CD45.1则仅在少数谱系（如SJL/J）中出现。CD45.1和CD45.2常用于追踪骨髓移植后小鼠造血细胞的来源。

2.造血干细胞

造血干细胞具备多能性和自我更新能力，能生成所有血液细胞，包括红细胞、白细胞和血小板。它们在血液癌症、自身免疫疾病和细胞治疗中具有重要作用。由于造血干细胞在骨髓和血液中含量极低且形态与白细胞相似，分离和鉴定这些干细胞依赖细胞表面标记物的检测。由其分化出的血液细胞主要为白细胞，包括淋巴细胞（如T细胞、B细胞、NK细胞）和粒细胞（如中性粒细胞、嗜酸粒细胞）。外周血单个核细胞不含粒细胞。

3.B细胞

B细胞和T细胞是适应性免疫的重要组成部分，分别负责体液免疫和细胞免疫。B细胞不仅通过表达特异性抗原受体（BCR）发挥免疫效应，还作为抗原提呈细胞参与免疫调节。常用的B细胞标记物包括CD19、CD20和CD45R（B220）。未成熟B细胞表达CD19、CD20、CD34、CD38和CD45R，但不表达IgM；成熟B细胞则主要通过IgM和CD19标识。活化B细胞表达CD30，血浆B细胞表达CD78，记忆B细胞通过CD20和CD40标记。

4.T细胞

T淋巴细胞（T细胞）是由骨髓中的造血干细胞在胸腺中分化成熟后，通过淋巴和血液循环分布到全身各大免疫器官和组织，发挥免疫功能。T细胞是适应性免疫系统中最主要的淋巴细胞类型，负责执行多种免疫反应。

根据功能特性，T细胞可分为辅助性T细胞、细胞毒性T细胞和调节性T细胞；根据T细胞受体（TCR）的类型，分为αβT细胞和γδT细胞；根据CD4和CD8的表达，T细胞可进一步划分为CD4+ T细胞和CD8+ T细胞，它们又可以细分为不同的亚群。此外，T细胞根据活化阶段可分为初始（naive）T细胞、效应（effector）T细胞和记忆（memory）T细胞，其中CD45RA和CD45RO分别是人类初始T细胞和记忆T细胞的重要表型标志。

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