流式细胞术因其高通量和多参数分析的优势,广泛应用于免疫学研究。通过同时检测多个标记物,研究人员能够更全面地了解免疫细胞群体的组成与功能状态。之前已介绍了一些常用的流式免疫细胞标记物,本文将继续为大家深入探讨更多相关内容。
免疫细胞流式检测常用标记物
1.树突状细胞
树突状细胞是一类成熟后具有树突样突起的专职抗原呈递细胞,能够识别、摄取和处理抗原,并将抗原肽呈递给T细胞。它们不仅参与固有免疫反应,还在固有免疫与适应性免疫之间起着桥梁作用。主要分为经典树突状细胞(cDC)和浆细胞样树突状细胞(pDC)。
目前尚无特异性树突状细胞标记物,但可以通过组合多种标记物的表达来鉴定这些细胞。树突状细胞不表达其他白细胞谱系的标记物(如CD3、CD14、CD19、CD20、CD56),不同亚群可能表达MHC II、CD1、CD8a、CD11b、CD11c等标志分子。
2.NK细胞
自然杀伤细胞(NK细胞)是固有免疫的重要组成部分,具有淋巴细胞形态,但不表达特异性抗原识别受体,能在不需要预先致敏的情况下直接杀伤靶细胞。人类NK细胞的常见表面标志物为CD56和CD16,而小鼠NK细胞则表达NK1.1和CD49b(DX5)。需要注意的是,T细胞亚群中的NKT细胞与NK细胞在表型和功能上有相似之处,NKT细胞同时表达CD16、CD56、NK1.1、CD49b,并能产生颗粒酶。因此,在进行NK细胞分型时,通常需要通过CD3阴性选择排除T细胞。来源于PK136克隆的NK1.1抗体常用于检测小鼠NK细胞,但在某些小鼠品系(如AKR、BALB/c等)中不适用。
3.单核细胞
单核细胞源自骨髓中的髓系造血干细胞。在M-CSF和单核细胞生长因子的刺激下,髓系干细胞分化为前单核细胞,进一步发育成单核细胞并进入血液循环。
CD14是单核细胞的相对特异性标记物,其中CD14^high CD16^-的人单核细胞被称为经典单核细胞,而CD14^+ CD16^+细胞则为非经典单核细胞。对于小鼠单核细胞,常用的标记物包括CD11b和Ly-6G(Gr-1)。
4.巨噬细胞
巨噬细胞广泛存在于多种组织中,依据其所在位置和功能可分为不同类型,如肝脏Kupffer细胞、小胶质细胞、肺泡巨噬细胞、肾脏系膜细胞、破骨细胞、脾脏红髓巨噬细胞等。它们负责吞噬功能,并广泛参与抗感染、抗肿瘤、免疫应答和免疫调节。根据活化状态和分泌细胞因子的差异,巨噬细胞可分为经典活化的M1型和选择性活化的M2型。
M1或M2极化是一个精细调控的过程,涉及多个关键的信号通路、转录调控、表观遗传机制以及转录后调控网络。
常用的巨噬细胞标记物包括CD11b、CD14、CD16、CD68、F4/80(小鼠)。CD80和CD86常用作M1型巨噬细胞标记物,而CD163和CD206则为M2型巨噬细胞的标志。
5.巨核细胞
巨核细胞是来源于骨髓造血干细胞的细胞,负责产生血小板。血小板主要功能为凝血,同时也参与免疫应答和炎症反应。
巨核细胞和血小板的常用标记物包括CD9、CD31、CD41、CD42b、CD51、CD61和CD62P。
6.红细胞
红细胞(也称为红血球)是血液中数量最多的细胞,主要负责氧气和二氧化碳的运输,并具有一定的免疫功能。
CD235a是一种表面唾液酸糖蛋白,广泛表达于红系前体细胞和成熟红细胞。TER-119是一种特异性的小鼠红细胞谱系单克隆抗体,能够识别从早期成红细胞到成熟红细胞的各个分化阶段。
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流式抗体推荐 | |||
种属 | 细胞群 | 流式抗体搭配 | 货号 |
Human | T/B/NK细胞群检测 | CD45-PerCP | PCP-30039 |
CD3-FITC | FITC-30004 | ||
CD16-PE | PE-30061 | ||
CD56-PE | PE-30008 | ||
CD19-APC | APC-30066 | ||
Human | Th1/Th2 细胞群检测 | CD3-PerCP/Cyanine5.5 | PCP55-30004 |
CD4-FITC | FITC-30005 | ||
IFN-γ-PE | PE-30053 | ||
IL4-APC | APC-30043 | ||
Mouse | Th1/Th2 细胞群检测 | CD3-PerCP/Cyanine5.5 | PCP55-30002 |
CD4-FITC | FITC-30001 | ||
IFN-γ-PE | PE-30074 | ||
IL4-APC | APC-30026 | ||
Human | Treg细胞群检测 | CD4-FITC | FITC-30005 |
CD25-PE | PE-30035 | ||
CD127-APC | APC-30033 | ||
Mouse | Treg细胞群检测 | CD4-FITC | FITC-30001 |
CD25-PE | PE-30017 | ||
FOXP3-APC | APC-30055 |